雨生紅球藻中基于CRISPR/Cas9 遺傳操作體系的建立及在提高生物量和蝦青素含量中的應(yīng)用技術(shù)研究
研究背景
蝦青素是一種具有著色、抗氧化、保健等多種功能的類胡蘿卜素,自然界中雨生紅球藻是蝦青素積累量最高的微藻,規(guī)模養(yǎng)殖,商業(yè)化量產(chǎn),但仍存在諸多瓶頸問題,如生物量偏低、目標(biāo)產(chǎn)物積累率偏低 、工藝流程復(fù)雜、培養(yǎng)周期長等。
為了充分發(fā)揮微藻生產(chǎn)潛力,優(yōu)化生產(chǎn)工藝,有必要利用分子生物技術(shù)研究微藻的遺傳背景,解決生物量偏低,脂質(zhì)累積率偏低、培養(yǎng)周期長等瓶頸問題。從而,從源頭改善雨生紅球藻生物量、生產(chǎn)模式、以及蝦青素品質(zhì)等。目前生物信息學(xué)和基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展,新型基因編輯技術(shù)已經(jīng)成為解決上述問題的重要策略。
研究內(nèi)容
基因編輯技術(shù)是一種通過人工設(shè)計和改造核酸酶達(dá)到對基因進(jìn)行定點修飾的技術(shù)。其核心是通過對生物體特定DNA片段的插入、敲除、修飾或替換等手段,使預(yù)期基因組序列發(fā)生改變并遺傳,進(jìn)而實現(xiàn)目標(biāo)基因的編輯。
CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)是2020年“諾貝爾”化學(xué)獎項目。項目通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在雨生紅球藻中建立,鑒定雨生紅球藻基因組上每個編碼或非編碼位點的功能。然后,通過對藻種基因敲除、基因敲入、基因抑制和激活、多重編輯、功能基因組篩選等,完成編輯改造出新的雨生紅球藻藻種,具有生物含量高,蝦青素累積含量高、藻油的提取效率高等特點,同時改造雨生紅球藻藻種細(xì)胞壁,提高。
項目進(jìn)展
該項目為世界首創(chuàng),國際微藻權(quán)威專家、中國科學(xué)院水生生物研究所黃開耀團(tuán)隊和艾詩特科研團(tuán)隊共同努力,項目在2年內(nèi),在國際上率先建立雨生紅球藻基因編輯的遺傳操作體系,已成功將優(yōu)質(zhì)基因轉(zhuǎn)入雨生紅球藻中,初試驗其蝦青素含量提高了1.47倍。目前,藻種已進(jìn)入實際預(yù)生產(chǎn)階段。后續(xù)利用基因編輯遺傳操作體系提高蝦青素產(chǎn)量和含量、改造細(xì)胞壁的研究結(jié)果,將陸續(xù)發(fā)布。